Dosage spectrofluorimétrique (grandes séries)

Nous pouvons réaliser le dosage fluorométrique de vos échantillons d’ADN. Il s’agit d’une prestation réalisée au DTAMB.

Le dosage est réalisé sur un spectrofluorimètre Safas Xenius et en microplaque noire afin d’éviter les contaminations optiques .

Le Xenius est un appareil de grande qualité, d’une technologie innovante et dont l’optique permet des mesures de haute sensibilité.

Ce Spectrofluorimètre de la société Safas (Monaco) UV-Visible à double plan optique permet des mesures spectrofluorométriques en cuves mais surtout en microplaques. Il est équipé d’une thermostatisation et le système de guidage des microplaques a été changé (en 2015) permettant en outre une agitation performante. Une mise à jour complète de son optique en excitation et en émission (2015) lui donne des caractéristiques d’un appareil neuf.

Acquisition : matériel acquis en 2004 par l’IFR 41 et remis à niveau en 2015.

Caractéristiques :

  • 2 monochromateurs à grande ouverture numérique (f/3), à réseaux concaves blazés à correction d’aberrations (bien plus énergétiques que de simples réseaux holographiques).
  • Plage spectrale à l’excitation et à l’émission : 185 à 1050 nm.
  • Répétabilité ± 0,01 nm.
  • Possibilité de visualisation de l’ordre zéro (en lumière blanche).
  • Plage spectrale d’excitation standard : 260 – 1050 avec lampe sans ozone.
  • Plage spectrale d’émission standard : 185 – 900 nm.
  • Bande passante à l’émission et à l’excitation : fixe de 2, 5, 10 ou 20 nm.
  • Dispositif de fentes variables. Fentes continûment et symétriquement variables sur les deux monochromateurs de 2 à 20 nm, par incréments de 0,1 nm.
  • Haute vitesse de défilement : réalisation de spectres jusqu’à 7000 nm/min sans déformation avec préscan automatique.
  • Concept unique de défilement, évitant la classique déformation de bande passante que l’on observe avec les procédés archaïques de sélection de la vitesse de défilement.
  • Très haut niveau de sensibilité, grâce au concept exclusif à double plan optique.
  • Source : lampe Xenon 150W sans ozone, ultra stable.
  • Photomultiplicateur sélectionné à hautes performances type R928.
  • Possibilité de balayage à l’excitation, à l’émission, ainsi que synchrone sur les deux monochromateurs.
  • Dispositif permettant de travailler compartiment ouvert.
  • Logiciel de cinétiques multicuves multi longueurs d’ondes.
  • Module logiciel pour mesure de calcium intracellulaire.
  • Dispositif de Bioluminescence et Chimiluminescence
  • Dispositif de polarisation de fluorescence automatique à l’excitation et à l’émission.
  • Platine motorisée pour portoir 10 cuves automatique ultra-rapide
  • Dispositif de lecture de microplaques
  • Agitation des microplaques.
  • Possibilité de lectures sur des microvolumes (5 µl) à l’aide d’un système capillaire en format 96 puits.

Acquisition : matériel acquis en 2004 par l’IFR 41 et remis à niveau en 2015.

Informations pratiques :

Echantillons :

Les échantillons doivent être fournis dans de l’eau ou du TE. Des contaminants variés (sels, composés organiques, métaux …) peuvent interférer et conduire à de mauvais résultats.

Vos échantillons (nombre > 30) seront conditionnés en microplaques 96 puits et disposés en colonnes (grande séries) ou en barrettes de 8 tubes 0,2 ml.

Merci de fournir, avec vos échantillons, un descriptif (nom, position) sous forme d’un fichier Excel dont vous trouverez le modèle ici : BC_XENIUS_FLUO_DTAMB.xls.

Merci d’apporter ou d’envoyer vos échantillons au DTAMB.

Résultats :

Les résultats sont communiqués par mail sous forme d’un fichier au format pdf.